RIA（放射免疫法）实验技术服务

RIA的基本原理

利用标记抗原(xAg)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)发生竞争性结合。竞争结合反应可用下式表示：

*Ag   +   Ab←→*Ag-Ab

+

Ag

↓↑

Ag-Ab

    在上述反应系统中，当只有xAg和Ab时，只产生xAg-Ab复合物，并保持可逆的动态平衡。如反应系统中同时加入Ag，因Ag与xAg免疫活性完全相同，故与Ab具有相同的亲和力。当xAg为一定量、Ab为有限量、Ag与xAg的量之和超过Ab上的有效结合位点时，xAg-Ab复合物的生成量与Ag的量之间呈一定的函数关系。即当Ag量少时，Ag-Ab生成量少，而xAg-Ab生成量增多，游离的xAg减少。可见xAg-Ab

复合物生成量是受Ag含量制约的。因此，在放射免疫分析中，用已知不同浓度的标准物和一定量的xAg及限量的Ab反应，采取一定方法将结合相(B)与游离相(F)分开，即可算出该标准物在各浓度下xAg-Ab复合物的结合百分率(B／T)。

    这一反应过程，可用以下简图说明。图中黑圈表示标记抗原，白圈表示非标记抗原，长条代表抗体，每个抗体有两个结合位点，标记抗原与非标记抗原对抗体有同等的结合能力。 

从图中可见，当标记抗原与抗体量一定时，结合率(B／Bd--F)随待测样品中抗原量增加而降低。在实际工作中，以B／T的值为纵坐标，标准物的浓度为横坐标，绘成曲线，即竞争性抑制曲线，或称准确曲线。将未知浓度的样品按同样条件操作，所得结合率(％)与标准曲线相比，即可查出样品中待测抗原的浓度。

    放射免疫分析典型的操作程序是首先配制一系列已知浓度的标准溶液，并各取一定体积；于其中加入一定量的标记抗原和特异性抗体；在一定条件下使之反应平衡后，采取适当方法将B与F分离；分别测量其放射性；绘制标准曲线。对样品中抗原的测定，则可在同样条件下操作，在标准曲线上查得含量。

放射免疫(RIA)实验服务需知

◇服务内容：您只需将需要检测的动物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）种类和检测指标（介素类、因子类）及标本数量（48T/96T）通知我司业务人员即可。在接到客户标本当日起，2周内将检测报告交到手中！ 

◇质量保证：检测用所有试剂全部都为进口试剂，适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本，灵敏度极高，多年专业酶免服务，我们保证对所售任何产品一概负责到底，每一份实验结果都真实可靠！

◇注意事项：在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

◇液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

◇血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

◇细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

实验说明

请您在取材前尽量先与我中心销售技术人员沟通，前期的取材直接影响到您的实验结果。我们有成套的售前售后服务。 

收费标准

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更多实验技术服务请见中心网站，或来电询洽！

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