腺病毒实验技术服务
腺病毒实验技术服务
腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含35 000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5,端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。人体腺病毒已知有33种,分别命名为adl~ad33,研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA,已知的转录单位至少有5个:正Ⅰ区位于病毒基因组左侧,可再分成正ⅠA和正ⅠB,与细胞转化有关;正Ⅱ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的复制;正Ⅲ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白;正Ⅳ区位于ad2基因组右端,受正Ⅱ区编码的DNA结合蛋白质调控;第5个转录单位在病毒感染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。
本中心腺病毒特性:本中心所提供的腺病毒表达系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架,在克隆、包装、扩增等各部分条件做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上,提供各种带有不同报告基因、不同标签的重组腺病毒载体服务。同时我们还可以根据客户需要完成各种较高难度的载体构建,如双基因载体构建,具有细胞毒性作用基因的腺病毒载体构建等。所得到的毒液可以用于信号转导、基因转位、Co-IP、动物实验、干细胞研究等科研实验。我们的服务:(1)表达目的基因的重组腺病毒载体构建服务(最大插入片段5kb)(2)超大量及超高滴度的重组腺病毒扩增和纯化服务(3)重组腺病毒载体的鉴定(4)shRNA基因沉默效应验证(5)表达shRNA的重组腺病毒载体的构建服务(6)构建各种带不同标签和不同报告基因的腺病毒载体(7)可调控表达的重组腺病毒载体(8)目的基因的克隆,或者定购(9)质量控制
i. 特定引物作RT-PCR鉴定ii. 滴度测定根据客户需求,可以选择分段选择其中的服务项目服务承诺(1)我们承诺从得到cDNA到完成纯化的服务时间将在70个工作日内完成(2)我们承诺所提供的病毒毒液的滴度在1011PFU/ml以上(纯化后),总量不少于1012 PFU/ml(3) 所提供的毒液量:2~3ml(4) 可以包装任何有细胞毒性作用的基因;保证100%的包装成功率附加服务(1) 根据客户需要,构建带有双基因的重组腺病毒载体(2) 根据客户需要,更换启动子(3) 根据客户需要,提供各种带报告基因的重组腺病毒(4) 根据客户需要,带不同标签的重组腺病毒(5) 根据客户需要,提供对照病毒毒液
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