表皮细胞培养
表皮细胞培养
1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1 平方厘米小块。
2．EDTA 处理：先置入0.02％EDTA 中室温置5 分钟。
3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。
4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。
5．温消化：取出表皮单独处理，用剪刀剪成更小的块后，置入新的0.25％胰蛋白酶中，37℃再消化30～60 分钟。
6．用吸管轻轻反复吹打，使成细胞悬液。
7．培养液：通过80 目不锈钢纱网滤过后，低速离心，吸上清，直接加入Eagle液和20％小牛血清，制成细胞悬液，接种入碟皿中，CO2 温箱培养.
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