条件性基因敲除
条件性基因敲除小鼠
条件性基因敲除小鼠与全敲小鼠的应用区别在于条件性基因敲除小鼠可以使靶基因的表达或缺失发生在小鼠发育的某一阶段或某一特定的组织器官,而该基因在其它组织或细胞表达正常。从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。
条件性基因敲除小鼠技术原理:
条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和 FLP-FRT来实现的。比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个LoxP(或FRT)序列,得到flox(Flanked by loxP)小鼠。将flox小鼠与带有细胞特异性表达的Cre(或Flp)的小鼠交配繁殖,以获得在特定细胞里把目标基因敲除掉的小鼠,即条件性基因敲除小鼠。其应用可以使靶基因的表达或缺失发生在实验动物发育的某一阶段或某一特定的组织器官,从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。
条件性基因敲除小鼠制备技术对比
目前,条件性基因敲除小鼠可通过基于胚胎干细胞的基因打靶技术、EGE技术(基于CRISPR/Cas9 技术)获得。
技术名称 |
优势 |
局限性 |
基于胚胎干细胞的基因打靶技术 |
成熟、可靠、精细是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术 |
1)需要ES细胞,目前只有小鼠有高效的ES细胞,其它模式动物的ES细胞还不能实现大规模应用。 |
EGE技术 |
基因敲除/敲入效率高,速度快,可实现多基因、多物种基因敲除/敲入,系统构建简单 |
1)存在脱靶风险,但通过选择合适的sgRNA可以有效降低脱靶率, In vivo脱靶可通过传代去除 |
条件性基因敲除小鼠制备流程
基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备模式动物流程
EGE技术制备条件性基因敲除小鼠流程
条件性基因敲除小鼠应用
1、用于具有胚胎致死性目的基因的研究;
2、用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能;
3、与控制Cre或Flp表达的其它诱导系统相结合,还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。
条件性基因敲除小鼠制备服务优势
Specialty-最专业的设计方案
-百奥赛图团队专注基因敲除 20余年,为您提供最专业的设计方案。
Special-独特技术体系
百奥赛图在已有技术的基础上,进行层层优化,形成独特技术体系。
-C57BL/6 胚胎干细胞(省去回交时间)
-EGE(基于Cas9技术):百分百RNA注射(降低随机插入率)
Strict-严格质控标准
实施双重质控金标准,让您放心拿到模式鼠。
-southern杂交(模式动物验证金标准)
-染色体核型分析(最佳ES细胞注射)
Standard-标准操作流程
严格按照SOP进行实验,预防操作陷阱。
我们给您的终产品
不少于两只的F1杂合子小鼠以及相关实验数据。
我们会提供给您相关的检测方法和最终检测报告,您可以自己进行核实检测,也可以在我们的帮助之下完成。
在您的课题进行过程中,我们会每两周为您发送一次课题进展汇报,内容包括课题进展的每一步结果(包括电泳图、PCR结果、酶切结果和杂交结果等),让您清楚的了解自己课题的进展情况,就如同自己的学生在做lab meeting 一样。
条件性基因敲除小鼠订制方式:
电话:010-56315318
相关技术资料
运费说明
一、 一次运输: 1. 正常情况下,我司安排运输不少于2只(包括2只)活体模式动物,若客户要求增加运输数量(数量足够情况下),我公司只留下1-2只活体作为备份,不再做二次运输; 2. 活体动物完成运输1个月后,客户经理联系客户确认动物保种情况,若客户保种成功,我们即处死备份活体动物; 3. 活体动物完成运输1个月后,若客户要求继续保种或未做回复者,即日起开始计算代养费用。 二、 二次运输: 1. 若一次运输客户顺利拿到不少于2只(包括2只)活体动物时,客户要求二次运输者,所产生费用由客户承担,同时我司将剩余活体全部运输,不做活体备份;如需我司继续保留活体备份,即日起开始计算代养费用。 2. 若一次运输客户拿到少于2只活体动物时,客户要求二次运输者,所产生费用由我司承担。