Rosa26定点插入转基因小鼠
原理 Rosa26 基因已被证明在大部分组织和细胞中都有表达,而表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化,因此在这个区域定点插入外源DNA,在各组织中表达的可能性都非常高。
I Rosa26位点Knockin小鼠--ES细胞同源重组技术
原理 利用Cre-Loxp系统对目的基因进行可诱导表达调控,当两个Loxp位点位于同一染色体上且方向一致时,Cre重组酶会特异性的将两个Loxp位点间的序列切除。构建Rosa26-(SA /pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA打靶载体,转入ES细胞,获得在Rosa26目的位置发生正确同源重组的ES克隆,并将其注射到小鼠囊胚内细胞团,获得嵌合鼠,通过与野生型小鼠繁殖得到正确同源重组ES细胞来源的Knockin小鼠。Knockin小鼠可与各类表达Cre重组酶的小鼠杂交,获得组织特异性表达的小鼠模型。
服务周期 7-15个月
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