3.1    Southern杂交检测服务 BCG‐TS‐0009

1）Southern杂交：

Southern印迹杂交（Southern blot）是1975年由英国人southern创建的，是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。

Southern杂交检测原理： 

具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。

一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的大小。

Southern杂交检测的必要性

在制备基因敲进和条件性基因敲除模式小鼠过程中，Southern blot是非常重要的一步。在我们的经验中，采用ES细胞方式制备，大约有20%的概率有随机插入；采用CRISPR/Cas9的方式，大约有35%的概率有随机插入。而随机插入必须通过Southern blot才能排除。

2）探针标记方式：

DIG标记探针

3）Southern杂交技术服务流程

4）Southern杂交产品形式：

显影胶片、完整的实验报告；

5）Southern杂交质控标准：

条带清楚，灰度比例适当；

6）Southern杂交生产周期

依具体情况而定。

7）质量承诺

杂交预实验成功的前提下，杂交质量不合格，无条件全额退款；

8）客户需提供的信息

提供详细的待检测序列背景资料（待杂交目标基因序列和引物序列及PCR扩增条件）；  

品牌优势

百奥赛图成立于2009年，是国内最早一批对外提供基因打靶模式动物制备服务的生物技术公司，经验丰富。目前，已开发基因敲除/敲入小鼠近600种，基因敲除/敲入大鼠50余种，。基因敲除/敲入细胞系40余种，坚持做Southern杂交检测服务。服务群体不仅包括以哈佛大学、NIH、 东京大学、牛津大学、北京大学、清华大学、中科院动物所、中科院神经所等为代表的国内外科研学术机构，也包括以协和医院、北大医院等为代表的科研实力强大的综合性医院，更包括以强生、罗氏、GSK、默克等为代表的国际顶尖医药企业，品牌知名度及美誉度极佳。