整体实验服务--动物疾病模型构建--多囊卵巢综合征模型
武汉云克隆诊断试剂研究所
整体实验服务--动物疾病模型构建--多囊卵巢综合征模型
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是一种复杂的、异质性内分泌紊乱综合征,以高雄激素血症、高胰岛素血症、胰岛素抵抗和持续性无排卵为主要特征。PCOS 患者的临床表现多样,其近期和远期并发症对女性的身心健康影响较大。据报道,PCOS 是无排卵性不孕的最常见原因,另外PCOS 患者2 型糖尿病、心血管疾病和子宫内膜癌的发病风险与非 PCOS 患者相比明显升高。鉴于PCOS 对女性健康的巨大危害,对其发病机制的研究已经成为全球妇科内分泌专家关注的焦点。目前认为PCOS可能的致病原因包括雄激素生成过多、下丘脑垂体功能紊乱、胰岛素抵抗、细胞凋亡及卵泡发育异常等,其中细胞凋亡和卵泡发育异常导致 PCOS 发病的理论受到越来越多学者的关注,但是具体的发病机制尚需要进一步挖掘。
1.实验动物
SPF级SD大鼠,健康,雌性,四周左右,体重为200g左右。
2.实验分组
实验分三组:模型组(30只),对照组(30只),空白组(30只)。
3.主要试剂
丙酸睾丸素。
4.建模方法
将1g丙酸睾丸素粉末溶解于100mL注射用无菌大豆油中,配成10mg/mL的油剂。模型组大鼠颈背部皮下注射含丙酸睾丸酮的油剂,按照1mg/100g体质量剂量注射,连续注射4-8周;对照组按体重注射相应体积的无菌大豆油,连续注射4-8周;空白组不做任何处理。
5.模型的评价
5.1阴道涂片测试发情周期变化
对照组大鼠阴道上皮细胞涂片呈周期性变化,周期在4-5天,动情周期变化规律;模型组大鼠阴道上皮细胞持续角化,其始终处于动情间期,失去规律的动情周期变化。
5.2交配成功率及妊娠率
通过观察大鼠交配后雌鼠产生的防止津液倒流的阴道栓确定其是否交配成功,交配成功的大鼠也可进一步观察它们的妊娠情况确定其排卵情况。
5.3小鼠血清性激素生化指标测定
生化指标检测显示模型组睾酮水平显著升高,促卵泡素、促黄体素、泌乳素水平下降。
5.4卵巢组织切片变化
模型组卵巢结构发生病理性改变,卵巢内见囊状扩张卵泡并呈现多囊样病理改变,锁闭卵泡多发,潴留囊肿明显,颗粒细胞减少,卵泡膜细胞增多。
A、B组为对照组,C、D组为PCOS组。PCOS组可见部分卵泡呈囊状扩张,闭锁卵泡多发。
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