EMSA探针

    电泳迁移率实验或凝胶迁移（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术，可用于定性和定量分析。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理。

经典EMSA是使用放射性同位素P32标记探针，由于具有放射性和寿命短等缺点，现在EMSA实验常使用非放射性物质标记探针，如生物素、荧光素或地高辛。非放射性分子标记EMSA探针的最大好处是可以在核酸合成过程中进行标记，具有高效、省时、费用低等优点。

设计EMSA探针应注意以下几点：

（1）防止探针封闭成环；

（2）防止错位配对；

（3）排除目标序列以外的结合位点；

（4）防止产生空间位阻；

（5）适当考虑AT/GC比例；

（6）一般EMSA探针几十个碱基对（30－60 bp），探针序列应该包括目的序列（结合转录因子的序列），探针太长会产生过多结合位点，导致结果分析困难，还会产生超螺旋结构掩盖结合部位；

（7）核酸合成量不能太少，量太少不准确，易产生多余的单链；

（8）合成好的探针最好进行纯化；

（9）如果是RNA探针，要防止降解；

（10）探针宜采用生物素或荧光标记；

（11）标记只能在探针末端。

NF-κB P65探针

常见的探针有NF-κB P65，用于检测激活的NF-κB。NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物，分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等刺激下可以激活NF-κB。IκB-α会在Ser32和Ser36位点被磷酸化，随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后，其核定位序列被暴露，从而被转位到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。根据标记探针检测核内是否有NF-κB，就可以判断NF-κB是否被激活。

目前已经有很多商品化的用于EMSA实验的NF-κB探针，直接购买即可，省时、省力、节约费用。如果需要其它探针，请说明具体要求，按需制备。

A探针费用（NF-κB P65）	500/探针	EMSA优先只做 NF-κB指标，如有其 它特殊指标，需要和相关技术确认。 本价格包括探针的设计和合成，实验 完成后可提供探针序列
EMSA探针费用(其他指标）	500/探针

 

 注意事项：

1.标本要求：速冻的新鲜组织、细胞、蛋白；

2.样本-80℃度保存，防止蛋白降解，干冰运输。

 

 

武汉华联科生物技术有限公司

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