试剂盒名称：小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒

产品的用途：仅供科研ELISA检测试剂盒

检测的原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

标本的处理：

（1）细胞培养上清液

根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。

（2）脑脊液

根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。

（3）血浆

①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。

②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书指定方法检测。

小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒实验过程中酶标比色仪的使用

    酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相对于空气的真实A值应为1.083±0.01(1.073～1.093)，重复测定数次，其A值均应1.083±0.05(1.078～1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000～2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000～2.900，而其线性范围仅0.000～2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。

    酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15～30℃，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。

测读A值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第一次在最适波长(W1)，第二次在不敏感波长(W2)，两次测定间不移动ELISA板的位置。例如OPD用492nm为W1，630nm为W2，最终测得的A值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

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