颅脑损伤(TBI)大鼠模型
建模方法:
1. 称量大鼠,腹腔注射水合氯醛(15%)350mg/kg麻醉,头部正中剃毛后用碘酒及酒精擦拭手术区域。 2. 沿头部正中稍偏右切开头皮约2cm,钝性分离软组织及骨外膜后暴露颅骨,在人字缝前方2 mm,颅骨中线旁2 mm,用颅骨钻打开直径为4 mm的圆形骨窗,保持硬脑膜完好无损,采用自由落体撞击至脑挫伤的方法。 3. 用一个40g的金属重物自25cm高处垂直坠落,撞击置在硬脑膜上的圆柱体,致伤冲击力为 1000g·cm造成右顶叶脑挫裂伤,致伤面积为4mm×4mm,致中度脑损伤,然后用骨蜡封闭骨窗,缝合头皮。 4. 待大鼠苏醒后自由饮水,正常饲养。 5. 对照组仅作右顶叶相应部位颅骨开窗,不致伤。 样本采集: 1.血液标本留取:分别于术后24h、72h及7d水合氯醛麻醉大鼠后,于下腔静脉取血2ml,室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清,放入-80冰箱冻存。 2.脑组织标本留取:取脑后用4%多聚甲醛溶液固定,蔗糖溶液脱水后,经OCT包埋做冰冻切片,切片10um。