NCG-HLA-A2.1

品系名称：NOD/ShiLtJGpt-Prkdc^em26Cd52Il2rg^em26Cd22H2-K^{emCin(HLA-A2.1)}/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T003278

背景：NOD/ShiLtJGpt

品系描述

HLA-A编码人的I类主要组织相容性复合物（Major histocompatibility complex I, MHC I）的α链。MHC I由α链及β链（由B2M基因编码）组成，α链包含负责抗原结合的可变区α1、α2和序列恒定的α3及跨膜、胞内区。MHC I表达于所有的有核细胞表面，负责抗原提呈，参与CD8+ T细胞成熟及CTL识别过程^[1]。研究证实，α3与CD8的相互作用具有种属特异性，全人源化的HLA-A2.1转基因小鼠CD8+ T细胞成熟受损^[2]，而将HLA-A2.1的α1、α2和鼠源的α3及后续部分拼接成为嵌合片段后制作的转基因鼠，则CD8+T细胞发育正常，且具有正确的HLA-A2.1限制性CTL识别^[3-7]。

集萃药康自主研发的HLA-A2.1品系选择重度免疫品系NCG作为背景，使用在人群中出现频率较高的HLA-A*02:01^[8]基因片段替换在小鼠中对T细胞成熟过程影响较大的H2-K基因的胞外部分，利用基因编辑技术制作了NCG-HLA-A2.1小鼠模型，该模型拥有人源的α1、α2、α3和鼠源的跨膜及胞内区。人源α1、α2能够以人类HLA-A2.1抗原结合区提呈抗原，鼠源胞内区则完成胞内信号传导，同时，NCG背景使其能够接受人类造血干细胞移植，人源的α3可与人源CD8相互作用，促进T细胞的成熟及CTL识别。NCG-HLA-A2.1是造血系统人源化的理想模型。

品系策略

NCG-HLA-A2.1小鼠人源化策略

特点：

1.以NCG为基础，拥有重度联合免疫缺陷特征

2.由鼠源MHC I和人源HLA（HLA-A*02:01）组成的嵌合蛋白，有人源的抗原结合区和鼠源的信号传导区

3.促进免疫系统的人源化，特别是CD8+T细胞的成熟

应用领域

1、 疫苗研究

2、 造血干细胞移植

3、 免疫系统人源化

4、 免疫学相关研究

验证数据

1. MHCI表达检测

图1 NCG-HLA-A2.1小鼠人源 HLA-A2.1表达检测。该品系小鼠细胞表面能够正确表达人源HLA-A2.1。

2.T/B/NK细胞比例检测

图2 NCG-HLA-A2.1人源化小鼠T/B/NK细胞比例检测。NCG对照鼠和NCG-HLA-A2.1人源化小鼠外周血中几乎没有CD3+T、CD19+B、NK细胞，也没有CD4+/CD8+ T细胞。NCG-HLA-A2.1人源化纯合小鼠及NCG小鼠体内的T/B/NK细胞比例类似。

3.体内药效实验

在NCG-HLA-A2.1小鼠模型皮下接种Raji-PBMC混合细胞后测试Ab-1抗体的肿瘤抑制药效

Data from WuXi Biologics

图3 基于NCG-HLA-A2.1小鼠的体内药效试验。将对数生长期的淋巴瘤细胞Raji与HLA match的PBMC细胞混合接种至6-8周龄的NCG-HLA-A2.1（HLA人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约70mm³时随机分为Vehicle（NCG-WT）组（n=7），Vehicle（NCG-HLA）组（n=6），Ab-1（NCG-WT）用药组（n=7），Ab-1（NCG-HLA）用药组（n=7）并使用相应的药物进行治疗。每周给药2次，共给药6次。

结果显示NCG-HLA-A2.1小鼠与NCG-WT小鼠的肿瘤生长趋势一致，有较好的成瘤性；Ab-1对肿瘤生长有抑制作用，Ab-1（NCG-WT）用药组TGI=15.6%，Ab-1（NCG-HLA）用药组TGI=47.0%（图A）。四组小鼠体重变化趋势接近（图B）。

结果证明NCG-HLA-A2.1人源化小鼠是造血系统人源化及体内药效评价的理想模型。