BALB/c-hCD3E

品系名称：BALB/cJGpt-Tg(hCD3E BAC)/Gpt

品系类型：转基因

品系编号：T001550

背景：BALB/cJGpt

品系介绍

CD3E全名为CD3E molecule，存在于T细胞表面，与CD3其他亚基分子及T细胞受体α/β和γ/δ异二聚体一起构成T细胞受体-CD3复合物（TCR-CD3），参与T细胞的信号转导^[1,2]。研究表明，CD3E在T细胞发育中扮演者重要角色，此基因缺陷可导致严重的免疫缺陷疾病^[3,4]。部分TCR-CD3复合物存在于T淋巴细胞表面，接受抗原呈递细胞信号，激活胞内下游信号通路，在适应性免疫应答中起重要作用^[5]。

基于CD3靶点的双特异性抗体（CD3-TCB）在淋巴瘤的治疗方面大放异彩。CD3-TCB特异性识别T细胞上的靶分子CD3，同时又能够识别肿瘤特异性靶点，从而激发T细胞的靶向性免疫反应并带来特异性杀伤。

集萃药康利用转基因技术开发了BALB/c-hCD3E小鼠模型。BALB/c-hCD3E转基因小鼠可在CD3E自身启动子调控序列的控制下在T细胞表面表达人类CD3E蛋白，且hCD3E表达量可与小鼠自身mCD3E表达量相当。经验证，该人源化小鼠体内的hCD3E分子表现出良好的功能活性，参与机体免疫反应。为了使此品系能更好的评价双特异性抗体，我们建立相应的人源化肿瘤细胞系库，涵盖了CD3E双特异性抗体的热门靶点。将CD3E人源化小鼠与对应靶点人源化的细胞系相结合的评价体系，使双特异性抗体药物的评价更有效。

应用领域

1.T细胞发育与激活；

2.双特异抗体筛选。

验证数据

1.hCD3E蛋白表达分析

图1. BALB/c-hCD3E小鼠hCD3E表达检测。BALB/c-hCD3E小鼠T细胞表面能成功表达hCD3E，且96%的CD3+ T细胞表面共表达mCD3E及hCD3E。 

2.T/B/NK细胞比例检测

图2. BALB/c-hCD3E小鼠体内T/B/NK细胞比例检测。BALB/c-hCD3E小鼠体内T/B/NK细胞比例与野生型小鼠类似。

3.细胞因子释放

图3. BALB/c-hCD3E小鼠对抗体刺激的响应。BALB/c-hCD3E小鼠对anti-hCD3E及anti-mCD3E抗体刺激均有响应，野生型BALB/c仅对anti-mCD3E抗体刺激有响应。BALB/c-hCD3E脾脏细胞经anti-hCD3E及anti-mCD3E抗体刺激后，细胞因子TNF,IL2及IFNγ水平升高且趋势类似，且与野生型BALB/c脾脏细胞经anti-mCD3E抗体刺激后，细胞因子水平升高程度类似。

4.体内药效

图4 基于BALB/c-h的体内药效试验(与Crownbio合作验证)。（A）A20在hCD3E小鼠中的肿瘤大小(平均体积±SEM)， (B)使用CD3/CD20双特异性抗体后，小鼠血液中的B细胞耗竭。将对数生长期A20肿瘤接种至6-8周龄的BALB/c-hCD3E小鼠皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为PBS（对照）组，Bispecific mCD3xmCD20药物组及Bispecific hCD3xmCD20药物组（n=8），并使用相应的药物进行治疗。每周给药两次，共给药4次。

实验结果：Bispecific hCD3xmCD20和Bispecific mCD3xmCD20对肿瘤生长有相似的抑制作用（Bispecific hCD3xmCD20治疗组TGI=42%,Bispecific mCD3xmCD20治疗组TGI=50%）。Bispecific hCD3xmCD20治疗后，BALB/c-hCD3E小鼠血液中的B细胞被消耗，而wt-BALB/c小鼠血液中的B细胞无明显变化。

结果证明：BALB/c-hCD3E小鼠是评估CD3E双特异性抗体体内药效的理想模型。 

5.Humanized tumor cell lines