BALB/c-hPD1/hPDL1

品系名称：BALB/c-Pdcd1 ^{em1Cin(hPDCD1)}Pdl1 ^{tm1Cin(hPDL1)}/ Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004025

背景：BALB/cJGpt

品系描述

PDL1是细胞程式死亡配体1（Programmed cell death 1 ligand 1，PDL1），也称为表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源体1（B7 homolog 1，B7H1），由CD274基因编码，是大小为 40kDa 的一型跨膜蛋白^[1]。正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，促进具有抗原特异性的T细胞增殖。而细胞程式死亡受体1（PD1）与细胞程式死亡配体1（PDL1）结合，可以传导抑制性信号，减少抗原特异性T细胞增殖^[2]。

研究表明，肿瘤细胞通过高表达PDL1，与T细胞表面的PD1结合，传递抑制信号，从而逃逸免疫清除，阻断这一通路将解除T细胞抑制，活化T细胞，实现对癌细胞的杀伤^[3]。目前针对PD1/PDL1通路的上市药物已达5种，国内针对此通路的抗体药物研发也在如火如荼的进行中。

BALB/c是广泛应用于免疫学、肿瘤学等研究的近交系小鼠，来源于BALB/c背景的同源肿瘤细胞系众多，如结肠癌细胞CT26，乳腺癌细胞4T1，肝癌细胞H22及B淋巴癌细胞A20等。

集萃药康利用基因编辑技术在BALB/c小鼠上将Pdl1基因的胞外区替换为相应的人 PDL1基因的胞外区，同时完整保留了小鼠基因的胞内部分，保证了胞内信号的正确传导。而后将成功表达人源PDL1的小鼠与集萃药康自主研发小鼠BALB/c-hPD1配繁获得BALB/c-hPD1/PDL1。PD1与PDL1双人源化模型可用于人类PD1抑制剂、PDL1抑制剂以及两者联用的药效评价及安全性评价。

品系策略

应用领域

1.筛选人源PDL1抑制剂或人源PD1抑制剂；

2.人源PDL1抑制剂及人源PD1抑制剂联合用药药效及安全性评价；

3.抗肿瘤研究；

4.自身免疫病研究。

验证数据

1.PD1与PDL1表达检测

图1 BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠PD1与PDL1表达检测。anti-CD3e刺激后，BALB/c-hPD1/hPDL1纯合小鼠体内均能表达人源PD1和PDL1。人源化小鼠表达hPDL1的细胞比例与野生型小鼠表达mPDL1的比例类似。

2.T/B/NK细胞比例

图2 BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠T/B/NK细胞比例检测。野生型与BALB/c-hPD1/hPDL1纯合子小鼠的T/B/NK细胞比例接近。

3.体内药效实验

在BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠模型皮下接种CT26-hPDL1肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体与抗人PDL1抗体的肿瘤抑制药效

图3 基于BALB/c-hPD1/hPDL1的体内联合用药试验(CT26-hPDL1)。将对数生长期的PDL1人源化的结肠癌细胞CT26-hPDL1接种至6-8周龄的BALB/c-hPD1/hPDL1（PD1人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组，Keytruda单药组，Tecentriq单药组及Keytruda+Tecentriq联用组（n=6），并使用相应的药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。

结果显示：KEYTRUDA® 10mg/kg与TECENTRIQ® 10mg/kg联合组， 对肿瘤生长有抑制作用（TGI=65.61%，图A）。四组小鼠体重变化趋势接近（图B）。

结果证明：BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠是评估人PD1抗体与PDL1抗体联合用的体内药效的理想模型。

在BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠模型皮下接种CT26-hPDL1-mPDL1-KO肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体与抗人PDL1抗体的肿瘤抑制药效

图4 基于BALB/c-hPD1/hPDL1的体内联合用药试验（CT26-hPDL1-mPDL1-KO）。将对数生长期的PDL1人源化的结肠癌细胞CT26-hPDL1-mPDL1-KO接种至6-8周龄的BALB/c-hPD1/hPDL1（PD1与PDL1人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组，Keytruda+Tecentriq联用组（n=8），并使用相应的药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。

结果显示：KEYTRUDA® 10mg/kg与TECENTRIQ® 10mg/kg联合组， 对肿瘤生长有抑制作用（TGI= 41.76 %，图A）。四组小鼠体重变化趋势接近（图B）。

结果证明：BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠是评估人PD1抗体与PDL1抗体联合用的体内药效的理想模型。