B6-hPDL1

品系名称：B6/JGpt-Pdl1^tm1(hPDL1)/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T003455

背景：C57BL/6JGpt

品系描述

PDL1（细胞程式死亡配体1，Programmed cell death 1 ligand 1），也称为表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或B7同源体1（B7 homolog 1，B7H1），由CD274基因编码，是大小为40kDa的跨膜蛋白^[1]。正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，促进具有抗原特异性的T细胞增殖。而细胞程式死亡受体1（PD1）与细胞程式死亡配体1（PDL1）结合，可以传导抑制性信号，减少抗原特异性T细胞增殖^[2-3]。

大量研究证实，肿瘤微环境中的肿瘤细胞表面PDL1表达增高，与活化的T细胞表面的PD1结合，传递负性调控信号，导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡或免疫无能，从而抑制免疫反应。用抗体阻断PD1/PDL1信号通路已成为肿瘤免疫治疗的经典方法^[1-2],目前针对PD1/PDL1通路的上市药物已达5种。

集萃药康利用基因编辑技术将C57BL/6N小鼠中PDL1的胞外区替换为相应的人源片段，同时完整保留了小鼠PDL1的胞内部分，而后回交至C57BL/6J背景获得了B6-hPDL1人源化小鼠模型。该模型是筛选人类PDL1抑制剂药物的理想动物模型。

品系策略

图1 PDL1人源化策略示意图。

应用领域

1.人类PDL1抑制剂药效评价

2.人类PDL1抑制剂安全性评价

3.抗肿瘤研究

4.自身免疫病研究

验证数据

1.PDL1表达检测

图2 B6-hPDL1小鼠hPDL1表达检测。anti-CD3e刺激后，B6-hPDL1纯合小鼠在T细胞和B细胞表面均能表达人源PDL1。

2.T/B/NK细胞比例检测

图3 B6-hPDL1小鼠T/B/NK细胞比例检测。B6-hPDL1纯合、杂合小鼠及野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

3.体内药效试验

在B6-hPDL1小鼠皮下接种MC38-hPDL1肿瘤细胞系后测试抗人PDL1抗体

TECENTRIQ^TM（Atezolizumab）的肿瘤抑制药效

图4 基于B6-hPDL1的体内药效试验。将表达人源PDL1分子的结肠癌细胞MC38-hPDL1培养至对数生长期后接种至6-8周龄的B6-hPDL1（PDL1人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组，Tecentriq给药组（n=8），使用相应药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。数据以Mean ±SEM形式呈现。

结果显示：Tecentriq药物对肿瘤生长有抑制作用（TGI=67%）（图4A），小鼠体重变化趋势一致（图4B）。

在B6-hPDL1小鼠皮下接种MC38-hPDL1肿瘤细胞系后测试抗人PDL1抗体的肿瘤抑制药效

图5 基于B6-hPDL1的体内药效试验。将人源化修饰小鼠结肠癌MC38-hPDL1细胞移植到B6-hPDL1小鼠体内建立皮下肿瘤模型，待肿瘤体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组、Tecentriq给药组、受试药物组 (n=9)，以相应抗体进行治疗。每2天给药1次，共给药8次。

结果显示：通过与Vehicle组比较，阳性药物组和受试药物组肿瘤生长被抑制，TGI均超过50%（图5A）。四组小鼠体重变化趋势无明显差异（图5B）。

结果证明：B6-hPDL1小鼠是评估人PDL1抗体体内药效的理想模型。