B6-hPD1/hCD137

品系名称：B6/JGpt-Pdcd1 ^{em1Cin(hPDCD1)} Tnfrsf9 ^{em1Cin(hTNFRSF9)}/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004082

背景：C57BL/6JGpt

品系描述

程序性细胞死亡受体1 (Programmed cell death 1, PD1) ，免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白，是一种重要的免疫抑制分子，为CD28超家族成员。以PD1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。

大量研究证实，肿瘤微环境中的肿瘤细胞表面PDL1增高，同时与活化的T细胞上的PD1 结合，传递负调控信号，导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡或免疫失能，从而抑制免疫反应，进而促使肿瘤细胞的逃逸。用抗体阻断PD1/PDL1信号通路已成为肿瘤免疫治疗的经典方法^[1-3]。

CD137（4-1BB，TNFRSF9）属肿瘤坏死因子受体超家族成员，I型跨膜蛋白。在活化的CD4+T、CD8+T细胞表面表达，与CD137L结合构成T细胞共刺激信号^[4]。CD137主要在T细胞的免疫应答中发挥作用，可以协同CD28在免疫后期提供共刺激信号以及T细胞的存活信号，在维持免疫应答、抵抗免疫细胞凋亡、减少抗原特异性免疫细胞的清除以及增强免疫记忆方面发挥重要作用。

CD137能够刺激NK细胞增殖及IFNγ产生^[5]，通过促进细胞因子产生及B7上调表达介导DC活化[6]; 同时，CD137能够保护T细胞免于活化诱导的细胞死亡（activation-induced cell death，AICD）^[4]。另外，CD137表达于肿瘤组织血管壁，CD137L表达于多种人体肿瘤组织细胞表面，则CD137/CD137L在肿瘤微环境中发挥重要作用。

集萃药康采用基因编辑技术，将C57BL/6小鼠的Pdcd1胞外区替换为相应的人源基因片段，将小鼠Cd137基因编码胞外区的部分替换为对应的人源基因序列，而胞内区则保留完整的鼠源序列，自主研发了C57BL/6-hPD1/hCD137人源化小鼠模型。该模型可用于人类 PD1抑制剂、CD137激动剂以及两者联用的药效评价及安全性评价。

品系策略

应用领域

1.人CD137激动剂药效评价或人PD1 抑制剂药效评价；

2.人CD137激动剂及人PD1 抑制剂联合用药药效；

3.人CD137激动剂及人PD1 抑制剂毒理学评价；

4.抗肿瘤研究；

5.自身免疫病研究。

验证数据

1.T/B/NK细胞比例检测

图1 B6-hPD1/hCD137小鼠T/B/NK细胞比例检测。野生型小鼠与B6-hPD1/hCD137纯合子小鼠在外周血及脾脏中的T/B/NK细胞比例接近。

2.体内药效验证

在B6-hPD1/hCD137小鼠模型皮下接种MC38肿瘤细胞系后测试抗人CD137抗体及抗人PD1抗体KEYTRUDA^®（Pembrolizumab）的肿瘤抑制药效

A

B

C

图2 基于B6-hPD1/hCD137的体内抗人CD137抗体及抗人PD1抗体药效实验。

将对数生长期的结肠癌细胞MC38接种至6-8周龄的B6-hPD1/hCD137皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照组，n=5），CD137 Ab 3mg/kg组（n=5），Opdivo 5mg/kg组（n=4），CD137 Ab 3mg/kg + Opdivo 5mg/kg组（联合用药组，n=5）。每3天给药1次，共给药6次。

结果显示：CD137 Ab与Opdivo联合用药组（TGI=86.2%）及Opdivo 5mg/kg组（TGI=98.8%）对肿瘤生长均有明显的抑制效果，CD137 Ab 3mg/kg组可部分抑制肿瘤生长（TGI=48.3%）（图A）。五组小鼠体重无明显变化（图C）。

结果证明：B6-hPD1/hCD137小鼠是评估抗人CD137抗体及抗人PD1抗体联合药效的理想动物模型。