BALB/c-hPD1/hGITR

品系名称：BALB/c- Pdcd1^{em1Cin(hPDCD1)}/Tnfrsf18 ^{tm1(hTNFRSF18)} / Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004061

背景：BALB/cJGpt

品系描述

PD1(programmed death 1)是程序性死亡受体1，是免疫球蛋白超家族 I 型跨膜糖蛋白，是一种重要的免疫抑制分子，为 CD28 超家族成员。以 PD1 为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。默沙东（Merck） 及百时美施贵宝公司（BMS）的两款针对 PD-1 靶点的抗体药 Keytruda (Pembrolizumab， MK-3475)及 Opdivo (Nivolumab)，均于 2014 年由 FDA 批准上市，用于一线肿瘤治疗，有稳健的抗肿瘤作用。

GITR( glucocorticoid-induced TNFR-related protein)是TNF受体超家族成员，在包括T细胞在内的多种细胞表达，T细胞激活后其表达量上调，是T细胞的共刺激信号^[1]。其配体GITRL，主要表达在DC细胞，巨噬细胞和B细胞上，GITR/GITRL具有许多重要的功能，在调控T细胞增殖，抗肿瘤及自身免疫疾病方面具有重要作用^[3,4]；临床前研究表明，在部分实性肿瘤的治疗中，GITR激动剂、与PD-1/PD-L1抑制剂或者CTLA-4抑制剂联用等，都表现出非常乐观的效果。在临床癌症模型中，针对GITR通路的研究具有广阔前景 ^[2]。

我们在BALB/c-hPD1小鼠背景上将鼠源GITR的编码区替换为人源GITR，获得的BALB/c-hPD1/hGITR模型是筛选和评价人PD1抑制剂，anti-GITR及联合用药的理想动物模型。

品系策略

应用领域

1.GITR激动剂、PD1 抑制剂筛选及性能评价；

2.自身免疫病研究；

3.抗肿瘤研究；

4.GITR靶向药物与PD1 药物联合用药的筛选开发

验证数据

1.GITR和PD1表达检测

图1 BALB/c-hPD1/hGITR小鼠GITR和PD1表达检测。anti-CD3e刺激后，BALB/c-hPD1/hGITR双纯合子T细胞表面能成功表达hGITR和hPD1，细胞比例与野生型小鼠表达mGITR及mPD1的比例类似
 

2.T/B/NK细胞比例检测

图2 BALB/c -hPD1/hGITR小鼠T/B/NK细胞比例检测。BALB/c -hPD1/hGITR双人源化小鼠与野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

3.体内药效验证

在BALB/c-hPD1/hGITR小鼠模型皮下接种CT26肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体和GITR抗体的肿瘤抑制药效

图5 利用BALB/c-hPD1/hGITR小鼠进行抗人GITR抗体和PD1抗体药效验证实验。将对数生长期的结肠癌细胞CT26接种至6-8周龄的BALB/c-hPD1/hGITR皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为PBS（对照）组，a-PD1单用组，a-GITR单用组（n=5），并使用相应的药物进行治疗。每周给药2次，共给2周。

结果显示：a-PD1组（TGI=30%）及a-GITR组（TGI=19%）对肿瘤生长均有明显的抑制效果。

结果证明：BALB/c-hPD1/hGITR小鼠是评估抗人GITR抗体药效的理想动物模型。